质谱法(Mass Spectrometry,MS)即用电场和磁场将运动的离子(带电荷的原子、分子或分子碎片,有分子离子、同位素离子、碎片离子、重排离子、多电荷离子、亚稳离子、负离子和离子-分子相互作用产生的离子)按它们的质荷比分离后进行检测的方法。测出离子准确质量即可确定离子的化合物组成。
离子经质量分析器,检测器之后即成为质谱仪信号并输入计算机。样品由色谱柱不断流入离子源,离子由离子源不断进入分析器并不断得到质谱,只要没定好分析器扫描的质量范围和扫描时间,计算机就可以采集到一个个的质谱。如果没有样品进入离子源,计算机采集到的质谱各离子强度均为0。
质谱(又叫质谱法)是一种与光谱并列的谱学方法,通常意义上是指广泛应用于各个学科领域中通过制备、分离、检测气相离子来鉴定化合物的一种专门技术。质谱分析原理:将被测物质离子化,按离子的质荷比分离,测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。
质谱图的解析大致步骤如下:确认分子离子峰,并由其求得相对分子质量和分子式;计算不饱和度。找出主要的离子峰(一般指相对强度较大的离子峰),并记录这些离子峰的质荷比(m/z值)和相对强度。对质谱中分子离子峰或其他碎片离子峰丢失的中型碎片的分析也有助于图谱的解析。
质谱法特别是它与色谱仪及计算机联用的方法,已广泛应用在有机化学、生化、药物代谢、临床、毒物学、农药测定、环境保护、石油化学、地球化学、食品化学、植物化学、宇宙化学和国防化学等领域。
电泳法 电泳法是根据混合物中各成分在电场中的迁移速率差异进行分离的方法。电泳法分为凝胶电泳和毛细管电泳两种。凝胶电泳是将混合物加入凝胶中,然后在电场中进行分离。毛细管申泳是将混合物加入毛细管中,然后在电场中进行分离。电泳法可以分离出混合物中微量成分,具有高分离效率和高分辨率的优点。
实验室中常见的电泳方法有以下几种:纸电泳 指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是最早使用的区带电泳。将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲溶液的容器之间,样品点于滤纸中央。当滤纸条被缓冲液润湿后,再盖上绝缘密封罩,即可由电泳电源输入直流电压(100V~1000V)进行电泳。
常用的电泳技术有:醋酸纤维素薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳等。血清蛋白电泳以醋酸纤维素薄膜应用最为普遍。
电泳是指混悬于溶液中的样品(有机的或无机的,有生命的或无生命的)电荷颗粒,在电场影响下向着与自身带相反电荷的电极移动的现象。
另有研究发现,在离子交换机上,精子会以不同速度移动其方向。Y精子易移向阳极,而X精子则易移往阴极。1975年在日本有人发现阳极带有F个体的精子有70%;另外,离子交换机阴极部分则发现有88%不带有F个体的精子。其他科学家也有类似的发现。
基本原理:免疫扩散与电泳技术相结合。类型:对流免疫电泳、火箭免疫电离、免疫电泳、双向免疫电泳(交叉免疫电泳) (Rocket immunoelectrophoresis)基本原理:也称免疫扩散,抗原在含有定量抗体的琼脂糖中泳动,两者比例适宜时,在较短时间内生成锥形的沉淀峰。
解:(1)粒子在间做匀速直线运动,所以粒子受电场力和磁场力大小相等,方向相反,即 由此解出粒子进入偏转分离器时的速度为 (2)由左手定则可知粒子带正电。
质谱分析是一种测量离子质荷比(质量-电荷比)的分析方法,其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。
质量分析器是将同时进入其中的不同质量的离子,按质荷比m/z大小分离的装置。分离后的离子依次进入离子检测器,采集放大离子信号,经计算机处理,绘制成质谱图。离子源、质量分析器和离子检测器都各有多种类型。
其基本原理是使试样中各组分在离子源中发生电离,生成不同荷质比的带电荷的离子,经加速电场的作用,形成离子束,进入质量分析器。在质量分析器中,再利用电场和磁场使发生相反的速度色散,将它们分别聚焦而得到质谱图,从而确定其质量。第一台质谱仪是英国科学家弗朗西斯·阿斯顿于1919年制成的。
1、质谱连用是因为先有色谱分离,然后经过质谱才可以从混合物中检测有机物的。质谱对不同分子量的化合物本身具有选择性。质谱的原理是根据质核比来判断分子离子或碎片离子的相对质量,质量数不同的有机物一级质谱不同、质量数相同的不同有机物二级质谱不同,所以MS-MS联用可直接检测混合有机物。
2、ppm ,即百万分之一,如果质谱检测极限在1ppm,就表示能检测含量在百万分之一的物质。 Da ,指原子质量单位,如 C 就是12Da。mDa,一般在高分辨质谱仪上有这个参数,表示质谱的分辨率。质量测量准确度 质量测量准确度是质谱定性的重要依据。
3、质谱法是使待测化合物产生气态离子,再按质荷比(m/z)将离子分离、检测的分析方法,检测限可达1015~1012 mol数量级。质谱法可提供分子质量和结构的信息,定量测定可采用内标法或外标法。 4 质谱法的定义 质谱法是指试样被电离后,形成不同质荷比的离子,根据这些离子的质量数和相对丰度分析试样的方法[1]。
4、检测离子时,不论是使用光电倍增管的检测器,还是检测镜像电流的检测器(ICR/Oribtrap),其信号强度(在一定范围内)均与离子数量大致线性相关。 废话几句,可能会使题主感觉质谱不能定量的原因之一是,我们看到的质谱图常用相对强度作为纵坐标,即0-100%最强峰,而不展示信号的绝对强度。
5、没有必然联系。因为质谱图的横坐标表示离子的质荷比(m/z)值,与浓度无关。质谱图,不同质荷比的离子经质量分析器分开后,到检测器被检测并记录下来,经计算机处理后以质谱图的形式表示出来。